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我是小白,正在努力成为大白——我与免疫组化

小白      10-11 11:04      1659      3

大家好,我是科研狗的新成员:小白




我的口号是:

我是小白,正在努力成为大白!



希望大家以后多多关照小白!
接下来将由小白我来和大家讨论学习下免疫组化。
1
免疫组化原理是什么?
当我刚进实验室的时候,就被师姐拉去做了半个月的免疫组化,当时是个小白,师姐让做啥就做啥,也没多想。半个月后,老板问我:“免疫组化原理是什么?”。
我当时心里那个乐啊,早就料到老板会问的,“免疫组化利用的是抗体和抗原之间结合的特异性……”,我bulabulabula说了有十分钟,其实现在看来啥也没有,总结起来就是下面的图。
正当我信心满满等待老板的赞许的时候,老板问了,“那他有什么别的实验替代不了的地方呢?”,这下给我整懵了。
2
免疫组化优势在哪里?
我急急忙忙翻出做的笔记,吞吞吐吐地说:免疫组化相对于其他来说最大的优势是定位清晰,其次是灵敏度高,再次标本可以长期保存
老板:“笔记记得还不错,希望下次问你问题时答案不是在笔记上,而是在你脑海中,既然说最大的有点是定位清晰,那下次你给我找几张有代表性的图片来看看”
3
免疫组化定位典型例子
当然了,对于我这样聪明的人来说,这样的图片难不倒我,直接问度娘了。
胞膜阳性1

胞膜阳性2

胞浆阳性

胞核阳性1

胞核阳性2

我给老板发过去之后,老板回邮件了:
“图找的不错,你这个星期马上去做,如果做不出来上面样的结果,下个月工资就暂扣这了。“
”别……我只有300一个月啊“,我只能心里默默地说,”肯定老板的老板原来也这样对待他的“
4
对照必不可少——你染的是真的?
科研狗为了300块钱,也要拼了。按照protocol步骤一步一步,小心翼翼,最后染出了一张我认为完美无比的片子,开开心心地找老板。

“你是在浪费我的时间,也是在浪费你自己的时间,你的对照呢?我怎么知道这是我要看的蛋白的染色?

我只能跑去问师姐,师姐告诉了我如下:
阳性对照目的:排除方法和实验系统有无问题,用已知阳性表达抗原的切片。
阴性对照目的:排除有无一抗外的非特异性染色。分两种,a 阴性组织对照:已知阴性表达的组织。b 阴性试剂对照:空白对照,如PBS。

太好了,小白我总算明白了,那我就做足了对照再找老板。
当我拿着四张全没有的片子去找老板的时候,老板脸都绿了,自然免不了一次“友好祥和”的聊天。这些年来发现造成假阴性的原因如上图的科研狗支招中。
在接下来的免疫组化之中我和老板经历了很多次上述的聊天,经历就不多说了,说多了都是泪,主要如下:


科研小白终于做出了一次让老板满意的结果了,结果是已经过去了近两个月的时间。。。
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  • JMY 发布于:2016年01月05日 15:31:36

    大赞啊

  • mrrchen 发布于:2016年01月20日 16:28:33

    牛逼。

  • 路村科研狗 发布于:2019年04月03日 02:11:59

    图都没啦


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