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胶乳凝系抑制检测人绒毛膜促性腺激素实验

2014-04-02 275 收藏

实验原理

实验原理:以HCG作为抗原注入家兔体内,使其产生相应抗体,(抗HCG抗体)当这种抗体与抗原HCG相遇即可发生免疫反应,但此反应不能为肉眼所见采用化学方法将HCG交联在聚苯乙烯胶乳颗粒上制成HCG的胶乳抗原当此抗原与HCG抗体结合时就能够见到胶乳颗粒的凝集.试验时选用尿标本与抗血清充分混合,如果尿中含有大量HCG可结合抗体,再加入HCG胶乳就不会发生肉眼可见的凝集反应(使应该凝集的反应受到抑制)此为妊娠试验阳性.如果尿中HCG含量很低,不足与抗体血清作用,加入HCG胶乳时仍可发生凝集反应,成颗粒状,小块状沉淀,则为妊娠试验阴性.

实验步骤

实验试剂及器材:

1、妊娠诊断胶乳抗原呈均匀乳浊状,用前摇匀.

2、妊娠诊断抗血清.

3、反应板系背面涂以黑漆,正面用红漆划分为若干2.5cm×2.5cm方格的玻璃板,亦可用普通载玻片代替,以上试剂及器材可由生物制品供应单位购得,使用时应遵照说明书,试剂应保存于2-8℃冰箱(不得冰冻)试验前取出使其温度升至室温时再应用.

实验标本收集:

①、容器必须清洁,标本应及时送检.

②、如尿液浑浊,应先过滤后使用.

③、标本稀释易产生假阴性,故应采用清晨第一次尿标本为好.

④、严重的蛋白尿(2+以上者),血尿和细菌污染的标本均不适作此试验。

实验方法:在反应板的一格内滴加被检尿液一滴,加入抗HCG血清一滴,摇动混合30秒.再放置 2-3min,后加入胶乳抗原液一滴,继续缓慢摇动玻片2-3min,在光线较好处以肉眼观察结果.

实验结果判断:

l、如出现均匀乳状不透明的混浊,说明未发生派集,即为妊娠诊断试验阳性反应.报告为LAI试验阳性.

2、如出现颗粒小块状凝集,且液体呈均匀乳浊状态,消失而显透明感,即为妊娠试验阴性反应.报告为LAI试验阴性.

3、若出现均匀一致的漂乳凝集,为非特异性反应.应将标本离心沉淀后取上清液重试,查明原因.
注意事项
实验时室温如低于20℃反应缓慢,应适当延长两段的反应时间试验中尿液,抗血清,胶乳抗原加入的顺序不可颠倒,且液滴大小应一致,每次试验应做已知阳性和阴性对照。

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