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酶联免疫试验检测人绒毛膜促性腺激素实验

2014-06-05 316 收藏

实验原理

酶斑点法(薄膜EIA) 实验原理:酶班点测尿液中β-HCG的方法是一种单克隆与多克隆抗体相结合的酶联免疫测定法,其原理为:反应体系为一张经抗β-HCG抗体处理的膜,当尿液通过上层滤膜到达反应膜时,尿被中有HCG分子便与膜上的抗β-HCG抗体结合,于是当加入酶标HCG抗体复合物后,便与膜表面HCG分子上的另一个暴露位点呈特异性的结合,此时,将滤膜剥开,加入酶的底物显色溶液.使复合物着色,届时不同项色的点便可出现.

实验材料

  • 底物显色溶液
  • HCG标准液
  • 酶标-β-HCG抗体复合物
  • 实验步骤

    一、实验试剂:

    1、酶标-β-HCG抗体复合物

    2、底物显色溶液

    3、HCG标准液

    4、阴性对照

    5、反应体系:

    包被的抗HCG抗体,以上试剂应贮存2-8℃冰箱内不同批号试剂不要相互混用.当试剂盒从冰箱取出使用时,需置室度(18-3O℃)停放20min.

    实验标本采集:任何随意尿液均可运用该法测,但以第一次晨尿为好,收集尿液标本可用任何干净、干燥的塑料或玻璃容器如果不能立即对标本进行立即对标本进行测定,可放于2-8℃冰箱内48小时标本在测试前须放置室温(18-30℃)停放20分钟,不必,也不必过滤.

    二、实验方法:

    将尿样或HCG标准被充满反应体上端的小池,待完全吸收再加3清醒标HCG抗体复合物于小池中法膜上,待完全吸收1分钟后用液管尖剥离滤膜,最后加3个底物显色溶液于反应膜上,观察膜上结果,具体操作详见说明书.

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