冰冻切片固定实验

1.  将承有切片的载玻片放入加湿盒中,加4%PFA覆盖整个切片,盖上加湿盒,如为预先未固定过的组织,则于室温放置20 min,如是固定过的组织则放置5 min。

2.  吸去固定液,用毛细吸管或用喷水瓶以3×PBS冲冼切片,并温育5 min。

3.  用1×PBS重复步骤2操作,吸去PBS,按顺序以30%、60%、80%、95%和100%乙醇依次冲洗切片,每次2 min。

4.  晾干载玻片并保存在放有干燥剂的密封盒中,于-70℃存放可达数周。开盒前应将其平衡至室温。
 

图一、加湿盒
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