大肠杆菌质粒DNA的提取实验-碱裂解法
1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2 ml LB培养基。
2、37 ℃振荡培养过夜。
3、取1.5 ml菌体于Ep管，以4000 rpm离心3 min，弃上清液。
4、加0.l ml溶液I(1％葡萄糖，50 mM/L EDTA pH8.0，25 mM/L Tris-HCl pH8.0)充分混合。
5、加入0.2 ml溶液 II(0.2 mM/L NaOH，1％ SDS)，轻轻翻转混匀，置于冰浴5 min 。
6、加入0.15 ml预冷溶液III(5 mol/L KAc，pH4.8)，轻轻翻转混匀，置于冰浴5 min 。
7、以10，000rpm离心20min，取上清液于另一新Ep管
8、加入等体积的异戊醇，混匀后于0 ℃静置10min。
9、再以10，000 rpm离心20min，弃上清。
10、用70％乙醇0．5 ml洗涤一次，抽干所有液体。
11、待沉淀干燥后，溶于0．05 mlTE缓冲液中
