双向电泳操作步骤-组织来源的蛋白质样品的溶解和制备

1.  称重后将样品加入Dounch匀浆器。每100 mg 组织加入1.5~2.0 ml SDS/或尿素/溶解缓冲液,用B号研棒冲击50次,然后以A号研棒冲击50次。

2.  放置几分钟后,取一小份样品于200 μl 离心管100 000 g 离心2 h 以上或在200 000 g 以上离心1 h。保留上清(蛋白样品)。加样于第1向凝胶上。
 
注意事项
在离心前,样品在SDS/溶解缓冲液中煮沸5 min,千万不要在尿素/溶解缓冲液中加热样品。在第1向电泳前离心样品。
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