厌氧芽胞梭菌厌氧培养实验-厌氧袋培养法

厌氧培养的方法及其原理如何?
1.  将已接种细菌的血平板以及产气管,指示剂,催化剂放入塑料袋内,排出袋中气体,卷叠好袋口,并用大铁夹将塑料袋夹紧密,以防漏气。

2.  折断产气管,管内发生反应,产生CO2和H2。CO2供细菌生长需要,能促使许多厌氧菌生长,钯催化剂可催化H2和袋内的O2 生成H2O,从而耗尽袋内的O2,待其化学作用完成后,袋内即处于无氧状态。(由此造成厌氧环境约需半小时)

3.  于产气管弄破半小时后,将装有已还原成无色的美蓝指示剂安瓿弄破,若溶液变蓝色,表示美蓝被氧化,袋内仍有氧气存在,如指示剂不变蓝色,即表示袋内已处于无氧状态。

4.  将厌氧袋置37 ℃温箱孵育,48小时后观察结果。
注意事项
为了防止上述化学反应中生成的水流入平板,造成污染,应事先在厌氧袋内放多量的矽胶,以吸收水分。
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