干化学试剂带法检测尿蛋白实验

用钨酸沉淀尿液中的蛋白质,然后用双缩脲反应进行定量。
一、实验试剂;

1、1.75mmol/L 硫酸溶液

2、15g/L   钨酸钠溶液

3、双缩脲试剂;取硫酸铜(CuSO4*5H20)3.0g溶于500ml蒸馏水中加酒石酸钾钠 9.0 gKI 50g使溶,加 6 moL/LNaOH液 100 ml加水到1000 ml混匀.密闭贮存于聚乙烯瓶内。

4、蛋白质标准液(2.0 g/L)用准确定值的混合入血清,以 3 g/L的苯甲酸液作稀释,释成 2.0 g/L的浓度,贮存待用.

二、实验方法:

1、留取 24 h尿液标本,(加甲苯防腐),混合后,记总量,取小量尿液离心用滤纸过滤.

2、先作蛋白质定性+-++在10ml刻度离心管加尿液5ml如(+++-++++)则在管中加尿液lml蒸馏水4ml.

3、加75mmol/L硫酸2.5ml混合.

4、加钨酸钠2.5ml,充分混合静止10分钟

5、离心沉淀5分钟倾去上清,保留沉淀加生理盐水1.0ml混合,为测定管.

6、按下表操作

                                   测定管      标准管

Pr标液                                               1.0

双缩同试剂(ml)          4.0           4.0

充分混和,37℃水浴30分钟,用540nm处比色,读取SU

三、计算:

24小时尿蛋白总量(g)=(V/S)×50×(0.05/固定管尿量(ml))×(24总尿量/1000)
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