精液显微镜检查实验

一、精子活动率检查 用低倍镜观察有无精子的湿片,随即转为高倍镜,至少观察100个精子中,有尾部运动的精子所占的百分率即为活动率,计算公式为: 精子活动率%=(活动精子数/活动精子数十不活动精子数)× 100 二、精子活动力检查: 检查精子活动率的同时,将活动力按下列标准分级 0级          不活动          死精子 Ⅰ级           活动不良               精子动作迟钝原地转动 Ⅱ级          活动较好         精子活动,但方向不定 Ⅲ级          活动良好         精子呈有线活泼运动 正常精液             于排精后1小时Ⅱ级精子60% 三、精于形态学检查 1、精子密度>15×109/L的精液;可将液化精液直接涂片,<15×109/L的精液先要液化精液1500r/min离心10分钟,取沉淀物涂片。 2、将涂片空气中自然干燥,甲醛固定5分钟,用HE染色,3、待染片干燥后,在油镜下计数200个精子,报告正常异常出现率。2形态观察正常精子有头部,中间段与足部,HE染色头呈紫色,尾部呈白色或紫色。 四、精子密度与精子总数检查 1. 粗略估计法:将液化精液混匀后直接涂片,加盖玻片后在高倍镜下(40×)观察5个视野,取其平均数×109,即每升大概的精子数精子读数 一、实验原理:用NaHCO3破坏精液的粘稠性,以甲醛固定精子,将精液定量稀释后进行计数。
实验试剂:精液稀释液 NaHCO3 5g浓甲醛液1ml,蒸馏水加至100ml.

实验操作:

1. 取稀释液0.38ml于小试管中。

2. 用血红Pr吸取己液化混匀的精液20微升,加至稀释液内,稀释20倍。

3. 将稀释液混匀后.充入细胞计数室内.

4. 静置5分钟,让所有精子沉积下来,然后用高倍镜计数,中央大方格内四角和正中央共5个中方格内的精子数,计数以头部为主.

实验计算:精子数/L=5个中方格内精子数×109
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