聚丙烯酰胺凝胶不连续圆盘电泳实验
利用各种载脂蛋白在一定pH下所带电荷数量及颗粒大小不同的差异，从而在电场中获得不同的迁移庇，达到分离测定的目的，
一、实验试剂：
1. 凝胶储备液制备及工作混合液比例表
2. 脱色剂：乙醇1000ml，冰醋酸320ml加水至4000ml．
3. 染色剂：考马斯蓝0.46g，溶于400ml脱色剂中。
4. 溴酚蓝水溶液：溴酚蓝0.05g，水溶至100ml。
二、实验操作
1. 按上表所给的比例配制分离胶，3号试剂要最后加，之后快速混匀．立刻往已封底中的玻璃管中加入上述分离胶约至管长的2／3处，然后沿管壁轻轻加入一薄层水封闭空气．一般在20℃室温中约40分钟左右便形成凝胶．倾去水层，倒立在滤纸上将管内水分沥干，接着按上表已制浓缩胶，6号试剂最后加入，快速混匀，立刻加在分离胶之上距管口上缘8mm处，其上再轻轻加一薄层水，令其在日光灯照射下聚合，约20分钟左右即可聚合完毕，倾去水层．
2. 将管底口封闭打开，将装柱完毕的玻璃管插入电泳槽孔中（分离胶在下面），周围不得漏水．
3. 加样：先将4号液稀释（取2ml4号液，加水至6m1）．取血清0.5m1，加4号液释液1.5ml，加7号3滴及溴酚蓝试剂3滴，混匀．检查凝胶管上下口是否已浸在缓冲液中，否则要进行调整．用微量加液器吸取上面已经准备好的样品30－35ul（约含血清7.5ul），沿管壁慢慢将加样器针头伸到上端胶面处．将样品缓缓加到胶面上（要成层不要分散开来）。
4. 电泳：上槽接负极，下槽接正极，盖上电泳槽盖，开启电泳仪开关调节输出电压。使每管电流量为1－2mA，待溴酚蓝批示剂进入分离胶后，加大输出电压，使每管电流增至4－5mA，当溴酚蓝指示剂泳动到距管下次端0.5cm时停止电泳．
5. 剥胶：比电泳槽上取下胶管，用长针头注射器吸满水后，将针头紧贴管壁慢慢插入，且边插边旋转玻璃管，边将水注入，使凝胶与内管壁分离开，令其脱出，放入染色液中。
6. 固定与染色：让剥出的胶柱在染色液中染色30分钟，凝胶被国定，蛋白质染上蓝色，成若干个圆盘样区带。脱去浮色：将染色后的胶柱轻轻转入小试管中，加入脱色剂浸泡，并多换洗几次，直至背景清晰及区带清晰为止．
