E 玫瑰花环形成实验
正常人外周血中 T 细胞在体外能直接和绵羊红细胞（SRBC）结合形成玫瑰花样细胞团。这是因为人的T 细胞膜上具有能和SRBC 膜上的糖蛋白相结合的受体，称为E 受体。已证实E 受体是人T 细胞所特有的表面标志，因此本试验可作为人外周血T 细胞的鉴定和计数，同时作为人细胞免疫功能状态的一个检测指标，也是分离T 细胞的常用方法之一。本实验为示教内容，学生只看结果。
一、实验结果 计数 200 个淋巴细胞，凡结合3 个SRBC 以上者为E 玫瑰花阳性细胞，求出百分率即为T 细胞百分比。正常值为68±9.9%。
1. 取肝素抗凝血1 ml 加1 ml Hank's 液，混匀后用尖吸管将其加在2 ml分层液上。 2. 离心2000 rpm，30 分钟，用尖吸管吸取血浆与分层液界面处富含淋巴细胞的 悬液置于另一洁净试管中。
3. 用Hank's 液以1000 rpm，离心10 分冲洗细胞两次，末次弃上清后再加入Hank's 液1 ml，混匀，用微量加样器吸取0.02 ml 加于0.38 ml 白细胞计数液中，在血 球计数板上于低倍镜下计数，并根据下式算出每毫升细胞数。 然后用Hank's液配制成107 /ml细胞悬液。
4. 取107 /ml细胞悬液0.1 ml加0.1 ml经SRBC吸收的灭活NBS，再加0.2 ml0.5 %SRBC悬液，混匀，放37 ℃温箱5 分钟，低速离心500 rpm，5 分钟，然后放4 ℃冰箱2 小时或过夜。
5. 取出试管，轻轻使沉淀的细胞悬浮，用尖吸管取出一滴置于载玻片上，盖上已滴加瑞氏染液的盖玻片，于高倍镜下观察计数。
注意事项
1. SRBC 自绵羊体内取出后限在2 周内使用。
