细胞组分的化学反应实验-细胞内碱性蛋白和酸性蛋白的显示

由于不同的蛋白质分子所带的碱性和酸性基团的数目不同,在pH值不同的溶液中,蛋白质分子所带的净电荷多少不同。如在生理条件下,整个蛋白质所带负电荷多,则为酸性蛋白质;带正电荷多,则为碱性蛋白质。据此,可将标本经三氯醋酸处理提出核酸后,用不同pH值的固绿染液分别染色,细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白质显示出来。
一、方法

1.  以破坏脊髓法处死蟾蜍,将其腹面向上放人蜡盘中,剪开胸腔,打开心包。小心将心脏剪一小口,取心脏血一滴滴在干净载玻片一端,推片,按此法制备二张血涂片,室温晾干。

2.  将涂片作好标记放在70%乙醇中固定5分钟,室温晾干。

3.  放入5%三氯醋酸中60℃30分钟,抽提出核酸。

4.  清水冲洗多次(3分钟以上),以冲去痕迹的三氯醋酸。

5.  滤纸吸干玻片上水分。

6.  一张片放入0.1%碱性固绿(pH8.0~8.5)中染色10~15分钟,另一张片放入0.1%酸性固绿(pH2.0~2.5)染色5~10分钟。

7.  清水冲洗,盖上盖片镜检。

二、结果

经碱性固绿染色片中,胞质、核仁不着色,细胞核大部分被染成绿色,是为碱性蛋白质存在处。经酸性固绿染色片中,因胞质和核仁中有酸性蛋白,被染成绿色。
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