服务热线
178 0020 3020
SnapGene # Gateway®克隆技术简述
什么是Gateway®克隆技术？
Gateway®克隆技术是一种基于噬菌体lambda位点特异性重组特性的通用克隆方法(Landy, 1989)。Gateway®克隆技术提供了一种快速、高效的方法将DNA序列转移到多个载体系统中，用于功能分析和蛋白表达(Hartley等，2000年)。
Gateway®克隆技术有哪些优势？
使用Gateway®克隆技术具有以下优点：
-
使DNA序列快速高效转移到多个载体系统中，以进行蛋白质表达和功能分析，同时保持方向和阅读框架；
-
允许使用和表达多种类型的DNA序列（如PCR产物，cDNA克隆，限制性片段等）；
-
轻松适应将大量DNA序列转移到多个目标载体中；
-
适用于高通量（HTP）格式；
-
允许将你喜欢的载体轻松转换为Gateway®目标载体；
*参考资料：
https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/gatewayman.pdf
https://www.thermofisher.com/cn/zh/home/life-science/cloning/gateway-cloning.html
SnapGene如何模拟Gateway®克隆？
Gateway®克隆技术通过重组插入DNA片段，在不使用限制性内切酶的情况下构建质粒。
SnapGene模拟了这种方法的不同变化。
对于标准的Gateway®克隆，将DNA片段通过BP克隆反应插入到Donor Vector中，从而创建入门载体（Entry Vector）。然后将该片段在LR克隆反应中转移至目的载体，从而创建最终的表达载体。多站点Gateway®克隆最多允许同时插入四个片段（如下图）。
SnapGene通过自动引物设计简化了Gateway®克隆程序。换句话说，若你想设计一个Gateway®克隆程序，只需要选择你想加入的DNA片段，SnapGene将自动选择合适的引物。
附件